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测序微生物多样性分析流程

1 微生物多样性测序技术概述 1.1 微生物多样性测序的不同测序平台介绍(如Illumina、 PacBio、 Nanopore) 1.2 微生物多样性测序的测序策略选择(16S rRNA、ITS、宏基因组等) 2 微生物多样性测序的实验设计与样本采集 2.1 微生物多样性测序的样本来源和类型确定 2.2 微生物多样性测序的样本收集、保存与运输的方法 2.3 DNA/RNA提取方法及其对微生物多样性的影响 3 PCR扩增与文库构建 3.1 微生物多样性测序的目标区域(如16S rRNA V4区)的选择与引物设计 3.2 PCR反应体系及条件优化 3.3 微生物多样性测序的文库构建流程与质量控制 3.4 微生物多样性测序的测序接头的添加与barcode标记 4 高通量测序与数据产出 4.1 微生物多样性测序的测序平台操作与实验流程 4.2 微生物多样性测序的数据质量评估与过滤标准 4.3 微生物多样性测序的原始序列读长、覆盖率等基本统计分析 5 微生物多样性测序的生物信息学数据分析 5.1 微生物多样性测序的序列拼接与质量控制 5.2 OTU(Operational Taxonomic Units)聚类与物种注释 5.3 α多样性指数计算(如Chao1、Shannon指数等) 5.4 β多样性分析(如PCA、PCoA、NMDS, UniFrac或 Bray-Curtis距离) 5.5 群落结构差异性检验(如ANOSIM、PERMANOVA等) 5.6 功能预测(如基于PICRUSt、Tax4Fun等工具进行KEGG功能注释与富集分析) 6 微生物多样性测序的结果解读与可视化 6.1 微生物群落结构特征总结 6.2 特征菌群与环境/疾病关联性分析 7 微生物生态网络构建与核心微生物鉴定 7.1 Co-occurrence网络构建与分析 7.2 核心微生物识别及其功能探究 8 微生物多样性测序的报告撰写与研究成果发表 8.1 微生物多样性测序的科研报告结构与内容组织 8.2 微生物多样性测序的数据共享与科研诚信原则 8.3 微生物多样性测序的学术论文写作与投稿指南
首页 教程 测序微生物多样性分析流程 β多样性分析(如PCA、PCoA、NMDS, UniFrac或 Bray-Curtis距离)
β多样性分析是生态学和微生物组学等领域中常用的一种方法,用于量化不同样本之间的物种组成差异或群落结构变化。这种分析有助于我们理解环境变化、地理距离等因素如何影响生物群落的分布和构成。 1. 主成分分析(PCA):PCA是一种多变量统计方法,通过线性变换将原始数据进行降维处理,转换为一组各维度线性无关的新变量,称为主成分。在β多样性分析中,PCA可以用来可视化样本在物种组成上的差异,并找出主导这些差异的主要因素。 2. 列坐标分析(PCoA):PCoA,又称典范对应分析,同样是一种降维技术,但它是根据样品间的距离或相似性矩阵进行操作。在β多样性研究中,基于如UniFrac或Bray-Curtis距离等测度计算出的距离矩阵,PCoA可以直观展示样品在多维空间中的排列分布,从而揭示群落结构的异质性。 3. 非度量多维标度(NMDS):这是一种非参数的多元数据分析方法,适用于处理包含有不可度量距离的数据集。在微生物组学研究中,NMDS常被用来以二维或三维图形的形式展示样本间的物种组成差异,尽管实际的生态距离可能是多维的且难以直接度量。 4. UniFrac距离:UniFrac距离是专门针对微生物群落数据设计的,用于衡量两个样品之间微生物组成的差异。它考虑了物种的进化历史信息,分为未加权UniFrac(仅比较样品间存在的分支长度)和加权UniFrac(不仅考虑存在分支,还考虑物种丰度)两种形式。 5. Bray-Curtis距离:在群落生态学中,Bray-Curtis距离是一种常用的测度群落相似性的指标。它基于相对丰度计算样品间的距离,即考虑了物种的存在与否以及其相对丰度的差异。 综上所述,β多样性分析通过各种统计和数学方法,从多个层面揭示并比较不同生态系统或环境条件下生物群落的多样性和差异,对于深入理解生态过程、物种分布规律以及环境对生物群落的影响具有重要意义。

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