ELISA,全称酶联免疫吸附测定,是一种广泛应用的生物化学技术,用于检测和量化样本中的特定蛋白质或抗体。这项技术结合了抗原-抗体反应的特异性与酶催化的高敏感性。
在ELISA实验中,首先需要将已知的抗原或抗体固定在塑料板(通常是96孔板)上,形成固相。然后,将待测样本加入到孔中,如果样本中含有目标抗原或抗体,它们就会与固相上的抗原或抗体结合,形成抗原-抗体复合物。接下来,通过添加标记有酶的第二抗体,可以识别并结合到这个复合物上。最后,加入酶的底物,当酶催化底物发生反应时,会产生可测量的信号,如颜色变化或者光强度变化。这种信号的强度与样本中目标抗原或抗体的浓度成正比,因此可以通过比较信号强度来定量样本中的抗原或抗体含量。
ELISA具有操作简便、灵敏度高、特异性强、重复性好等优点,广泛应用于临床诊断、疾病研究、药物筛选、食品安全检测等领域。根据实验目的和设计的不同,ELISA又可分为直接法、间接法、夹心法等多种类型。