单克隆抗体是由单一B细胞克隆产生的高度均一、仅针对某一特定抗原表位的抗体,故称单克隆抗体。通常采用杂交瘤技术来制备,杂交瘤(hybridoma)技术是指将免疫动物中产生抗体的B细胞与能够无限增殖的骨髓瘤细胞融合,形成既能产生特异性抗体又能无限增殖的杂交瘤细胞的技术。
1. 杂交瘤技术的流程:
(1) 免疫:选择合适的动物(通常为小鼠),通过注射目标抗原使动物产生免疫反应。
(2) 细胞融合:从免疫动物体内提取脾脏细胞和骨髓瘤细胞,然后使用化学融合剂或电融合等方法将两者融合在一起。
(3) 筛选:在选择性培养基上筛选出既能产生特定抗体又能无限增殖的杂交瘤细胞。
(4) 克隆化:对筛选出来的杂交瘤细胞进行克隆化,得到能稳定分泌单一抗体的杂交瘤细胞株。
(5) 抗体生产:将杂交瘤细胞株接种到适当的生物反应器中进行大规模培养,从而大量生产单克隆抗体。
2. 单克隆抗体的特点:
(1) 高度均一:由于来自同一B细胞克隆,所以每个单克隆抗体分子都是一模一样的。
(2) 高亲和力:单克隆抗体只针对一个特定的抗原表位,因此具有很高的亲和力。
(3) 特异性强:由于其识别的抗原表位非常独特,因此具有很高的特异性。
(4) 可重复性好:可以大规模生产,且批次间一致性高。
3. 单克隆抗体的应用:
(1) 诊断试剂:如用于免疫组织化学、流式细胞术、ELISA等检测手段中的标记抗体。
(2) 治疗药物:如治疗癌症的靶向药物、自身免疫疾病的抑制剂等。
(3) 生物研究工具:如用于蛋白质纯化、细胞表面标记、蛋白相互作用分析等实验。