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分子生物实验

1 分子生物实验前准备 1.1 分子生物实验室安全规则和操作规程 1.2 分子生物实验室设备使用方法 1.3 分子生物实验材料的获取和处理 1.4 分子生物实验设计和预实验 2 分子生物学基础技术 2.1 DNA/RNA提取和纯化 2.2 PCR扩增 2.3 蛋白质提取和纯化 2.4 基因克隆和表达 2.5 基因敲除和敲入 2.6 荧光原位杂交(FISH) 2.7 其他分子生物学基本技术 3 高级分子生物学技术 3.1 下一代测序技术 3.2 RNA干扰技术 3.3 基因编辑技术(CRISPR/Cas9等) 3.4 ChIP-seq和ATAC-seq 3.5 单细胞测序技术 3.6 生物信息学分析 3.7 其他高级分子生物学技术 4 分子生物学应用领域 4.1 基因组学研究 4.2 转录组学研究 4.3 蛋白质组学研究 4.4 表观基因组学研究 4.5 系统生物学研究 4.6 生物技术与生物工程应用 5 分子生物学实验数据分析和解释 5.1 分子生物实验数据质量控制 5.2 数据统计分析 5.3 结果解读和报告撰写 6 实验伦理和科研诚信 6.1 实验动物伦理 6.2 人类样本伦理 6.3 科研诚信原则和实践 7 分子生物学前沿动态和新技术学习 7.1 学术文献阅读和综述 7.2 参加学术会议和研讨会 7.3 新技术学习和培训
首页 教程 分子生物实验 RNA干扰技术
RNA干扰(RNA interference, RNAi)是一种由双链RNA引发的序列特异性转录后基因沉默现象。这种现象最初是在植物和无脊椎动物中被发现,后来在哺乳动物细胞中也被证实存在。RNAi技术通过利用这一机制,可以有效地抑制特定基因的表达,从而改变细胞的生物学特性。 RNAi的过程主要包括以下几个步骤: 1. 双链RNA(dsRNA)的生成:这是RNAi的第一步,可以通过体外合成或者体内表达的方式产生。 2. dsRNA的切割:dsRNA被一种叫做Dicer的酶切割成短的双链RNA片段,称为小干扰RNA(small interfering RNA, siRNA)。 3. RISC复合物的形成:siRNA与一种叫做RISC(RNA-induced silencing complex)的蛋白质复合物结合,形成激活的RISC。 4. mRNA的识别和切割:激活的RISC通过碱基配对的方式识别并结合到靶mRNA上,然后在Ago2蛋白的催化下将靶mRNA切割,导致其降解。 5. 基因表达的抑制:由于靶mRNA被切割降解,对应的蛋白质无法被翻译出来,因此基因的表达被抑制。 RNAi技术在科学研究和临床应用中都有广泛的应用。例如,在基础研究中,RNAi可以用来研究基因的功能;在药物研发中,RNAi可以用来筛选潜在的药物靶点;在临床治疗中,RNAi可以用来治疗一些遗传病或者病毒感染引起的疾病。

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