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分子生物实验

1 分子生物实验前准备 1.1 分子生物实验室安全规则和操作规程 1.2 分子生物实验室设备使用方法 1.3 分子生物实验材料的获取和处理 1.4 分子生物实验设计和预实验 2 分子生物学基础技术 2.1 DNA/RNA提取和纯化 2.2 PCR扩增 2.3 蛋白质提取和纯化 2.4 基因克隆和表达 2.5 基因敲除和敲入 2.6 荧光原位杂交(FISH) 2.7 其他分子生物学基本技术 3 高级分子生物学技术 3.1 下一代测序技术 3.2 RNA干扰技术 3.3 基因编辑技术(CRISPR/Cas9等) 3.4 ChIP-seq和ATAC-seq 3.5 单细胞测序技术 3.6 生物信息学分析 3.7 其他高级分子生物学技术 4 分子生物学应用领域 4.1 基因组学研究 4.2 转录组学研究 4.3 蛋白质组学研究 4.4 表观基因组学研究 4.5 系统生物学研究 4.6 生物技术与生物工程应用 5 分子生物学实验数据分析和解释 5.1 分子生物实验数据质量控制 5.2 数据统计分析 5.3 结果解读和报告撰写 6 实验伦理和科研诚信 6.1 实验动物伦理 6.2 人类样本伦理 6.3 科研诚信原则和实践 7 分子生物学前沿动态和新技术学习 7.1 学术文献阅读和综述 7.2 参加学术会议和研讨会 7.3 新技术学习和培训
首页 教程 分子生物实验 DNA/RNA提取和纯化
DNA/RNA提取和纯化是生物科学研究中的一项基础技术,主要用于从各种生物样本中分离出高质量的DNA或RNA。这些核酸可以用于后续的各种实验,如PCR、测序、杂交等。 DNA/RNA提取的基本步骤如下: 1. 去除蛋白质:使用蛋白酶K或SDS等去污剂来破坏细胞膜并使蛋白质变性,然后用酚/氯仿抽提以去除蛋白质。 2. 去除多糖:如果样本中含有大量多糖(如植物细胞),则需要使用苯酚/氯仿/异戊醇进行抽提,以去除多糖。 3. 凝胶电泳:将提取出的DNA/RNA通过琼脂糖凝胶电泳进行质量检查。 4. 纯化:使用乙醇沉淀或硅胶柱纯化方法,进一步去除杂质,提高DNA/RNA的纯度。 5. 测定浓度和纯度:使用紫外分光光度法测定DNA/RNA的浓度和纯度。 RNA提取的难度通常比DNA提取大,因为RNA不稳定,容易被RNase降解。因此,在RNA提取过程中需要特别注意防止RNase污染,通常会在工作台上设置RNA专用区域,并使用无RNase的耗材和试剂。 在实际操作中,不同的样本类型可能需要采用不同的提取方法和试剂,例如血液、组织、细菌、病毒等。此外,随着科技的进步,现在已有许多商业化的DNA/RNA提取试剂盒可供选择,大大简化了提取过程,提高了提取效率。

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