Sanger测序，也称为链终止法或双脱氧核苷酸测序，是由英国生物化学家Frederick Sanger在1977年发明的一种DNA测序技术。这种技术是目前最常用的DNA测序方法之一，也是第一个被广泛应用的自动化测序技术。
Sanger测序的基本原理是利用一种特殊的酶，即DNA聚合酶，在引物的引导下，将单个的核苷酸（A、T、C、G）逐个添加到正在合成的新链上。在这个过程中，如果加入的是正常的脱氧核苷酸，那么新链的合成就会继续进行；但如果加入的是双脱氧核苷酸，由于其缺少一个羟基，无法形成磷酸二酯键，因此新链的合成就会在此处停止。
Sanger测序的具体步骤如下：
1. 首先，需要对要测序的DNA片段进行PCR扩增，得到大量的拷贝。
2. 然后，选择一种能与PCR产物末端配对的寡核苷酸作为引物，与PCR产物结合。
3. 接着，加入DNA聚合酶和四种脱氧核苷酸（dATP、dCTP、dGTP、dTTP），以及四种双脱氧核苷酸（ddATP、ddCTP、ddGTP、ddTTP）。其中，双脱氧核苷酸的浓度要远低于正常脱氧核苷酸。
4. 在DNA聚合酶的作用下，每个引物都会开始合成新的DNA链。由于双脱氧核苷酸的存在，每条新链的合成都会在某个随机的位置停止，而停止的位置取决于遇到的第一个双脱氧核苷酸的种类。
5. 最后，通过电泳分离这些不同长度的新链，就可以得到一张“电泳图”，其中包含了待测DNA的所有信息。
总的来说，Sanger测序是一种非常有效的DNA测序方法，其主要优点是准确度高、重复性好、操作简单，但缺点是通量较低，不适合大规模的基因组测序。
