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细胞生物实验

1 细胞生物学基础 1.1 细胞结构和功能 1.2 细胞周期和分裂 1.3 细胞信号转导 2 细胞生物学实验设计与实施 2.1 细胞生物学实验设计原则 2.2 细胞生物学实验材料准备 2.3 细胞生物学实验设备操作 2.4 细胞生物学数据采集与分析 3 常见细胞生物实验 3.1 显微镜观察实验 3.1.1 普通光学显微镜观察 3.1.2 荧光显微镜观察 3.1.3 共聚焦显微镜观察 3.2 细胞培养实验 3.2.1 细胞培养实验之原代细胞培养 3.2.2 细胞培养实验之细胞系培养 3.2.3 细胞培养实验之无血清培养 3.3 细胞活力与毒性检测实验 3.3.1 MTT法 3.3.2 CCK-8法 3.3.3 琼脂糖平板克隆形成实验 3.4 细胞迁移与侵袭实验 3.4.1 细胞划痕实验 3.4.2 Boyden小室实验 3.5 细胞凋亡实验 3.5.1 Hoechst染色法 3.5.2 TUNEL法 3.6 细胞周期分析实验 3.6.1 PI染色流式细胞术 3.6.2 BrdU掺入实验 3.7 蛋白质表达水平检测实验 3.7.1 免疫荧光染色 3.7.2 ELISA 3.8 基因表达水平检测实验 3.8.1 RT-PCR 3.8.2 qRT-PCR 3.8.3 RNA-seq 3.9 细胞信号通路研究实验 3.9.1 细胞信号通路研究之抑制剂处理 3.9.2 细胞信号通路研究之免疫共沉淀 3.9.3 CHIP-qPCR 4 细胞实验报告撰写 4.1 细胞生物学实验目的和原理 4.2 细胞生物学实验材料和方法 4.3 细胞生物学实验结果和分析 4.4 细胞生物学实验结论和讨论
首页 教程 细胞生物实验 RNA-seq
RNA-seq,全称是RNA测序(RNA sequencing),是一种基于高通量测序技术的分子生物学研究方法。通过这种方法,我们可以获取细胞或组织中所有RNA分子的序列信息,从而深入了解基因表达调控、转录剪接等基本生命过程。 RNA-seq的基本步骤包括: 1. RNA提取:首先从细胞或组织中提取总RNA。 2. 文库构建:将提取的RNA逆转录为cDNA,然后进行打断、末端修复、接头连接和PCR扩增等一系列步骤,构建出可以用于高通量测序的文库。 3. 高通量测序:将构建好的文库送入高通量测序仪进行测序,得到大量的短序列reads。 4. 数据分析:对测序得到的reads进行质量控制、比对到参考基因组、定量分析等步骤,最终得出每个基因的表达量。 RNA-seq具有以下优点: 1. 灵敏度高:可以检测到低丰度的转录本。 2. 能够发现新的转录本和变异体:由于RNA-seq是对整个转录组进行测序,因此可以发现新的转录本和未知的剪接变异体。 3. 无偏性:与传统的微阵列技术相比,RNA-seq不受探针设计的影响,能够更准确地反映基因表达情况。 因此,RNA-seq在疾病研究、药物研发、生物进化等多个领域都有广泛的应用。

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