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细胞生物实验

1 细胞生物学基础 1.1 细胞结构和功能 1.2 细胞周期和分裂 1.3 细胞信号转导 2 细胞生物学实验设计与实施 2.1 细胞生物学实验设计原则 2.2 细胞生物学实验材料准备 2.3 细胞生物学实验设备操作 2.4 细胞生物学数据采集与分析 3 常见细胞生物实验 3.1 显微镜观察实验 3.1.1 普通光学显微镜观察 3.1.2 荧光显微镜观察 3.1.3 共聚焦显微镜观察 3.2 细胞培养实验 3.2.1 细胞培养实验之原代细胞培养 3.2.2 细胞培养实验之细胞系培养 3.2.3 细胞培养实验之无血清培养 3.3 细胞活力与毒性检测实验 3.3.1 MTT法 3.3.2 CCK-8法 3.3.3 琼脂糖平板克隆形成实验 3.4 细胞迁移与侵袭实验 3.4.1 细胞划痕实验 3.4.2 Boyden小室实验 3.5 细胞凋亡实验 3.5.1 Hoechst染色法 3.5.2 TUNEL法 3.6 细胞周期分析实验 3.6.1 PI染色流式细胞术 3.6.2 BrdU掺入实验 3.7 蛋白质表达水平检测实验 3.7.1 免疫荧光染色 3.7.2 ELISA 3.8 基因表达水平检测实验 3.8.1 RT-PCR 3.8.2 qRT-PCR 3.8.3 RNA-seq 3.9 细胞信号通路研究实验 3.9.1 细胞信号通路研究之抑制剂处理 3.9.2 细胞信号通路研究之免疫共沉淀 3.9.3 CHIP-qPCR 4 细胞实验报告撰写 4.1 细胞生物学实验目的和原理 4.2 细胞生物学实验材料和方法 4.3 细胞生物学实验结果和分析 4.4 细胞生物学实验结论和讨论
首页 教程 细胞生物实验 RT-PCR
RT-PCR,全称是Reverse Transcription Polymerase Chain Reaction,中文译为反转录聚合酶链反应。这是一种分子生物学技术,用于检测和测量细胞中特定基因的表达水平。 RT-PCR过程主要分为三个步骤: 1. 反转录:首先,利用反转录酶将RNA转化为cDNA(互补DNA)。这是因为RNA在体外不稳定,容易被降解,而DNA则相对稳定。这个过程被称为逆转录。 2. 聚合酶链反应:然后,通过PCR技术扩增这些cDNA。PCR是一个循环的过程,每个循环包括变性、退火和延伸三个步骤。在变性阶段,DNA双链被加热至高温而分开;在退火阶段,引物与模板DNA结合;在延伸阶段,DNA聚合酶在引物的引导下合成新的DNA链。经过多次循环,目标DNA片段的数量会指数级增加。 3. 产物分析:最后,通过凝胶电泳或其他方法分析PCR产物,可以得到目标基因的表达量信息。 RT-PCR广泛应用于分子生物学、遗传学、生物医学等领域,例如疾病诊断(如新冠病毒检测)、基因功能研究、基因表达调控研究等。

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