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细胞生物实验

1 细胞生物学基础 1.1 细胞结构和功能 1.2 细胞周期和分裂 1.3 细胞信号转导 2 细胞生物学实验设计与实施 2.1 细胞生物学实验设计原则 2.2 细胞生物学实验材料准备 2.3 细胞生物学实验设备操作 2.4 细胞生物学数据采集与分析 3 常见细胞生物实验 3.1 显微镜观察实验 3.1.1 普通光学显微镜观察 3.1.2 荧光显微镜观察 3.1.3 共聚焦显微镜观察 3.2 细胞培养实验 3.2.1 细胞培养实验之原代细胞培养 3.2.2 细胞培养实验之细胞系培养 3.2.3 细胞培养实验之无血清培养 3.3 细胞活力与毒性检测实验 3.3.1 MTT法 3.3.2 CCK-8法 3.3.3 琼脂糖平板克隆形成实验 3.4 细胞迁移与侵袭实验 3.4.1 细胞划痕实验 3.4.2 Boyden小室实验 3.5 细胞凋亡实验 3.5.1 Hoechst染色法 3.5.2 TUNEL法 3.6 细胞周期分析实验 3.6.1 PI染色流式细胞术 3.6.2 BrdU掺入实验 3.7 蛋白质表达水平检测实验 3.7.1 免疫荧光染色 3.7.2 ELISA 3.8 基因表达水平检测实验 3.8.1 RT-PCR 3.8.2 qRT-PCR 3.8.3 RNA-seq 3.9 细胞信号通路研究实验 3.9.1 细胞信号通路研究之抑制剂处理 3.9.2 细胞信号通路研究之免疫共沉淀 3.9.3 CHIP-qPCR 4 细胞实验报告撰写 4.1 细胞生物学实验目的和原理 4.2 细胞生物学实验材料和方法 4.3 细胞生物学实验结果和分析 4.4 细胞生物学实验结论和讨论
首页 教程 细胞生物实验 CCK-8法
CCK-8法,全称Cell Counting Kit-8,是一种基于WST-8的细胞增殖和毒性检测试剂盒。WST-8是一种类似于MTT的黄色水溶性四唑盐,能在电子载体1-methoxy PMS的存在下被线粒体内的脱氢酶还原为水不溶性的甲臜形式(formazan),生成的甲臜物在450nm处有最大吸收峰,其颜色深浅与活细胞的数量成正比。 使用CCK-8法进行细胞活力检测的步骤如下: 1. 将待测细胞接种到96孔板中,每孔加入一定量的细胞悬液。 2. 在适宜的条件下培养一段时间后,向每个孔中加入一定体积的CCK-8溶液。 3. 继续孵育一段时间(通常为1-4小时)后,用酶标仪在450nm波长处测定各孔的光密度值。 4. 根据空白对照孔和实验孔的光密度值计算细胞的存活率或抑制率。 CCK-8法的优点在于操作简单、快速,且灵敏度高,适用于各种类型的细胞,包括哺乳动物细胞、植物细胞、酵母菌等。此外,CCK-8法不需要洗涤步骤,避免了因洗涤过程中的细胞损失而导致的误差。

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