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细胞生物实验

1 细胞生物学基础 1.1 细胞结构和功能 1.2 细胞周期和分裂 1.3 细胞信号转导 2 细胞生物学实验设计与实施 2.1 细胞生物学实验设计原则 2.2 细胞生物学实验材料准备 2.3 细胞生物学实验设备操作 2.4 细胞生物学数据采集与分析 3 常见细胞生物实验 3.1 显微镜观察实验 3.1.1 普通光学显微镜观察 3.1.2 荧光显微镜观察 3.1.3 共聚焦显微镜观察 3.2 细胞培养实验 3.2.1 细胞培养实验之原代细胞培养 3.2.2 细胞培养实验之细胞系培养 3.2.3 细胞培养实验之无血清培养 3.3 细胞活力与毒性检测实验 3.3.1 MTT法 3.3.2 CCK-8法 3.3.3 琼脂糖平板克隆形成实验 3.4 细胞迁移与侵袭实验 3.4.1 细胞划痕实验 3.4.2 Boyden小室实验 3.5 细胞凋亡实验 3.5.1 Hoechst染色法 3.5.2 TUNEL法 3.6 细胞周期分析实验 3.6.1 PI染色流式细胞术 3.6.2 BrdU掺入实验 3.7 蛋白质表达水平检测实验 3.7.1 免疫荧光染色 3.7.2 ELISA 3.8 基因表达水平检测实验 3.8.1 RT-PCR 3.8.2 qRT-PCR 3.8.3 RNA-seq 3.9 细胞信号通路研究实验 3.9.1 细胞信号通路研究之抑制剂处理 3.9.2 细胞信号通路研究之免疫共沉淀 3.9.3 CHIP-qPCR 4 细胞实验报告撰写 4.1 细胞生物学实验目的和原理 4.2 细胞生物学实验材料和方法 4.3 细胞生物学实验结果和分析 4.4 细胞生物学实验结论和讨论
首页 教程 细胞生物实验 细胞培养实验之原代细胞培养
原代细胞培养是指从生物组织中直接提取并进行初次培养的细胞,主要用于研究细胞的基本性质、功能以及对外界刺激的反应等。以下是原代细胞培养的主要步骤: 1. 组织采集:根据实验需要,选择合适的生物组织进行采集。这通常涉及到手术或解剖技术。 2. 组织处理:将采集到的组织切成小块,并用酶(如胰蛋白酶或胶原酶)进行消化,以分散细胞。这个过程需要在无菌条件下进行,以防止微生物污染。 3. 细胞悬浮:消化后的组织经过过滤或离心,形成单细胞悬液。 4. 细胞接种:将细胞悬液接种到含有营养物质和生长因子的培养基中,然后将培养皿放入恒温、恒湿、含5%二氧化碳的培养箱中。 5. 细胞观察:定期通过显微镜观察细胞的生长状态,包括细胞数量、形态、活力等。 6. 细胞传代:当细胞长满培养皿时,需要用胰蛋白酶或其他酶进行消化,然后再接种到新的培养皿中,这就是细胞的传代。原代细胞一般只能传几代,超过一定代数后,细胞会失去原有的特性,这时就需要重新采集组织进行培养。 需要注意的是,原代细胞培养是一项技术要求较高的实验,不仅需要精细的操作技巧,还需要对细胞生物学有深入的理解。同时,由于原代细胞保留了体内细胞的大部分特性,因此常被用于疾病模型的建立、药物筛选等领域。

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