PCR(聚合酶链式反应)是一种在体外复制特定DNA片段的技术。这个过程是通过一系列的温度循环来实现的,每个循环包括三个步骤:变性、退火和延伸。
1. 变性:在这个步骤中,样本被加热到94-98℃,使得DNA双螺旋结构解旋成两条单链模板。这个过程通常持续15-30秒。
2. 退火:然后,温度会迅速降低到50-65℃,这个温度有利于引物与模板DNA的配对。引物是一段短的单链DNA,它能特异性地结合到模板DNA上的一个特定区域。这个过程通常持续20-60秒。
3. 延伸:最后,温度升至72℃,这是DNA聚合酶的最佳活性温度。在这一阶段,DNA聚合酶会沿着引物的方向合成新的DNA链,从而复制出两条新的DNA分子。这个过程通常持续1-2分钟。
每一轮循环都会使DNA的数量翻倍,因此经过大约30轮循环后,就能得到大量的目标DNA片段。PCR技术的应用非常广泛,包括基因克隆、基因突变检测、遗传病诊断、亲子鉴定等等。