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MLST分型

1 MLST概述 1.1 MLST定义和基本原理 1.2 MLST的发展历程 1.3 MLST在微生物学研究中的应用 2 MLST方法和技术 2.1 MLST基于PCR的方法 2.1.1 PCR引物设计 2.1.2 PCR反应条件优化 2.1.3 PCR产物纯化和测序 2.2 MLST基于新一代测序技术的方法 2.2.1 MLST的测序文库构建 2.2.2 MLST的高通量测序 2.2.3 MLST的数据分析和解读 2.3 其他MLST方法 2.3.1 MLST的多重PCR 2.3.2 MLST的荧光定量PCR 2.3.3 MLST的数字PCR 3 MLST数据库和软件 3.1 MLST数据库介绍 3.1.1 PubMLST 3.1.2 BIGSdb 3.1.3 EnteroBase 3.2 MLST数据分析软件 3.2.1 Geneious 3.2.2 MEGA 3.2.3 BioNumerics 4 MLST结果解读和应用 4.1 MLST分型结果解读 4.1.1 ST(序列型)和CC(克隆复合群)的概念 4.1.2 MLST结果的树状图和网络图的解读 4.2 MLST在疾病监测和防控中的应用 4.2.1 MLST在疾病暴发调查 4.2.2 MLST在病原体传播模式研究 4.2.3 MLST在抗生素耐药性监测 4.3 MLST在生物多样性研究中的应用 4.3.1 MLST在微生物种群结构分析 4.3.2 MLST在物种分化和进化研究 5 MLST实验操作和注意事项 5.1 实验材料准备 5.1.1 MLST实验的样品采集和保存 5.1.2 DNA提取 5.2 实验步骤 5.2.1 PCR扩增 5.2.2 PCR产物纯化 5.2.3 测序 5.3 MLST实验注意事项 5.3.1 实验安全 5.3.2 实验质量控制 5.3.3 实验数据管理 6 MLST未来发展趋势和挑战 6.1 新一代测序技术对MLST的影响 6.2 MLST在精准医疗和个性化治疗中的应用前景 6.3 MLST标准化和数据共享的问题与对策
首页 教程 MLST分型 MLST的荧光定量PCR
MLST全称为多态性序列分型(Multilocus Sequence Typing),是一种基于多位点基因序列差异来区分和分类微生物的方法。而荧光定量PCR(Quantitative Real-time PCR)则是利用荧光信号实时监测PCR扩增过程,以实现对目标DNA的定量检测。 将两者结合起来,就是MLST的荧光定量PCR。具体来说,首先需要选择若干个具有多态性的基因位点作为标记,然后通过PCR技术扩增这些位点的DNA片段,并在此过程中引入荧光标记。在PCR反应过程中,随着DNA片段数量的增加,荧光强度也会相应增强。通过监测荧光强度的变化,就可以实时、定量地了解每个位点的DNA片段数量,从而推断出样本中各个位点的基因型。 这种技术的优势在于,一方面可以实现对多个基因位点的同时检测,提高了检测效率;另一方面,由于是定量检测,因此可以获得更为精确的结果。此外,由于使用了荧光标记,所以可以在PCR反应结束后直接进行数据分析,无需再进行电泳等后续操作,进一步简化了实验流程。

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