MLST全称为多态性序列分型(Multilocus Sequence Typing),是一种基于多位点基因序列差异来区分和分类微生物的方法。而荧光定量PCR(Quantitative Real-time PCR)则是利用荧光信号实时监测PCR扩增过程,以实现对目标DNA的定量检测。
将两者结合起来,就是MLST的荧光定量PCR。具体来说,首先需要选择若干个具有多态性的基因位点作为标记,然后通过PCR技术扩增这些位点的DNA片段,并在此过程中引入荧光标记。在PCR反应过程中,随着DNA片段数量的增加,荧光强度也会相应增强。通过监测荧光强度的变化,就可以实时、定量地了解每个位点的DNA片段数量,从而推断出样本中各个位点的基因型。
这种技术的优势在于,一方面可以实现对多个基因位点的同时检测,提高了检测效率;另一方面,由于是定量检测,因此可以获得更为精确的结果。此外,由于使用了荧光标记,所以可以在PCR反应结束后直接进行数据分析,无需再进行电泳等后续操作,进一步简化了实验流程。